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③复习资料
2016年卫生资格《检验技士》考试预习资料(1)
时间:2015-11-02 作者:admin 来源:北京创想教育

甲状腺功能减退

  甲状腺功能减退简称甲减,是由于多种原因引起甲状腺激素合成、分泌或生物效应不足所致的一组内分泌疾病。按起病年龄可分为三型:

  ①起病于胎儿、新生儿者称呆小症;

  ②起病于儿童者为幼年型甲减;

  ③起病于成年者称成年型甲减。严重时,各型均可出现粘液水肿。

  引起甲状腺功能减退症的病因有:

  (1)原发性的,又分为获得性的(甲状腺被损毁或甲状腺激素合成障碍等)与先天性的(孕妇缺碘或口服过量抗甲状腺药、胎儿甲状腺素酶系异常、先天性甲状腺不发育等)。

  (2)继发性或下丘脑-垂体性的甲状腺功能减退,有垂体肿瘤、垂体手术或放射治疗后出血性垂体坏死以及TSH合成障碍等多种原因;

  (3)TSH或甲状腺素不敏感综合征,如TSH受体缺陷全身性甲状腺素不敏感型等。

淋巴细胞预成抗体测定

  【参考范围】死细胞数≥0.20(20%)为阳性。

  【影响因素】无

  【临床意义】

  采用受者血清与供者淋巴细胞共同孵育,在补体的作用下观察死亡细胞数的一种实验方法,目的是检查受者血清中是否存在抗供者淋巴细胞的抗体,或者抗供者组织抗原的抗体。

  受者血清中存在抗供者淋巴细胞的抗体时一般不适宜进行组织、器官移植。使用特异性抗体吸附柱通过血液透析方法可以去除大部分相应抗体,以适应组织、器官移植。

肿瘤疫苗种类

  第一类对肿瘤抗原表位性质的研究,导致了肿瘤分子疫苗的产生。具有肿瘤抗原决定基的肽疫苗和多糖疫苗已在研制,有的已在临床试用。此外,利用某种抗独特型抗体个有抗原内影像的特点,研制肿瘤独特型疫苗的工作也在进行中。

  第二类,确定了抗肿瘤免疫应答的主要效应细胞是TC细胞,导致了基因转染的肿瘤细胞疫苗的出现。TC细胞识别肿瘤表面的肽抗原(peptide)与MHCⅠ类分子的复合物,必需要有第二信号才能活化。

  这个第二信号可以由TC细胞表面的CD28分子与粘附分子B7的结合来提供。B7分子主要存在于活化的B细胞和抗原呈递细胞表面。在通常性况下,肿瘤细胞合成的胞内抗原经胞内降解、处理后,形成的肿瘤肽抗原与MHCⅠ类分子结合后,共表达于瘤细胞表面。

  其表面的肽抗原-MHCⅠ类分子复合物被TC细胞识别,同时其表面B7分子也与TC细胞的CD28分子结合,这样TC细胞就可被活化,从而杀伤带有该肽抗原的肿瘤细胞。大多数肿瘤细胞由于没有B7分子,因此肿瘤细胞虽具有肽抗原与 MHCⅠ类分子的复合物,但由于不能提供第二信号,所以不能活化TC细胞。如果用B7分子的基因转染肿瘤细胞,使之表达膜B7分子则这种肿瘤细胞就可以直接活化TC细胞,并被其杀伤。

细菌的鉴定程序

  ①细菌形态学检查;

  ②细菌生长特性;

  ③生物化学试验;

  ④抗原构造及血清学诊断;

  ⑤噬菌体及药物敏感试验;

  ⑥毒力测定及动物试验。

  阴虱生命发育的阶段

  阴虱为不完全变态发育,其生活史分为:卵、若虫和成虫三个阶段。

  1.卵:阴虱的虫卵一般都紧附在阴毛的毛干根部上,呈淡红色或铁锈色的椭圆形,类似于点状血痂。孵化期约为一星期。

  2.若虫:若虫是阴虱自卵孵化后,成长为成虫之前的形态。若虫的样子与成虫相似,但是要小很多。若虫的成长期亦为一星期左右。

  3.成虫:阴虱的成虫呈灰白色或褐色,雌虫一般比雄虫为大。

  一般阴虱的寿命是30天,但所有脱离人体的阴虱均会在2天内死亡。

  细菌基本结构

  细胞壁:细胞壁为细菌表面比较复杂的结构。是一层较厚(5~80nm)、质量均匀的网状结构,可承受细胞内强大的渗透压而不破坏。细胞壁坚韧而有弹性。

  细胞膜或称胞膜位于细胞壁内侧,包绕在细菌胞浆外的具有弹性的半渗透性脂质双层生物膜。

  胞浆是无色透明胶状物,基本成份是水、蛋白质、脂类、核酸及少量无机盐。细胞浆中还存在一些胞浆颗粒。

  质粒:这是染色体外的遗传物质,为双股环状DNA.分子量比染色体小,可携带某些遗传信息,例如耐药因子、细菌素及性菌毛的基本均编码在质粒上。质粒能进行独立复制,失去质粒的细菌仍能正常存活。质粒可通过接合、转导作用等将有关性状传递给另一细菌。

  核糖体:电镜下可见到胞浆中有大量沉降系数为70S的颗粒,即核糖体。其化学组成70%为RNA,30%为蛋白质。细胞中约90%的RNA和40%的蛋白质存在于核糖体中。当mRNA连成多聚核蛋白体(Polyribosome),就成为合成蛋白质的场所。细菌的70S核糖体由50S和30S两个亚基组成。链霉素能与细菌核糖体的30S基结合,红霉素能与50S亚基结合,从而干扰细菌蛋白质的合成而导致细菌的死亡;真核细胞的核糖体为80S,因此对人体细胞则无影响。

  胞浆颗粒:大多数为营养贮藏物,较为常见的是贮藏高能磷酸盐的异染颗粒(Metachrometicgranula),嗜碱性较强,用特殊染色法可以看得更清晰。根据异染颗粒的形态及位置,可以鉴别细菌。

  核质或拟核是细菌的遗传物质,决定细菌的遗传特征。

  游离脂肪酸检测

  游离脂肪酸检测-检验士辅导: 【参考值】

  0.3~0.9ammol/L.

  【生理学变异】

  饥饿导致NEFA增加。进食后使NEFA减少。消化吸收后,人体的50%~90%热能需要量由血浆中循环的NEFA供给。正常人体以这种方式每小时周转的脂肪酸量高达25克。这表明随机采取血浆测定NEFA在临床上不能应用。

  【临床意义】

  导致NEFA升高的疾病见于糖尿病酮症酸中毒:心肌梗塞后并发严重的心律失常者;应激状态。

  血清粘蛋白测定

  血清粘蛋白占血清总蛋白量的1%~2%,是体内一种粘多糖与蛋白质分子结合成的耐热复合蛋白质,属于体内糖蛋白的一种,电泳时与α球蛋白一起泳动,主要存在于α1和α2球蛋白部分。其粘多糖往往是由氨基葡萄糖、氨基半乳糖、甘露糖、岩藻糖及唾液酸等组成。粘蛋白成分复杂,分类和命名尚未一致。Meyer将糖与蛋白质的复合物以氨基已糖的含量进行分类,氨基已糖含量大于4%的称粘蛋白,小于4%的称糖蛋白。

  正常参考值:

  以蛋白计为0.71~0.87g/L

  以酪氨酸计为33.8±2.7mg/L

  临床意义:

  血清粘蛋白增高常见于肿瘤(尤其是女性生殖器肿瘤)、结核、肺炎、系统性红斑狼疮、风湿热、风湿性关节炎等。

  血清粘蛋白减少常见于广泛性肝实质性病变。

  血清粘蛋白的连续测定对于同一病例病程的转归(病变的扩大或缩小、肿瘤有无转移、肿瘤手术切除或其他治疗效果)的判断有一定的参考价值。

  离子选择电极法

  离子选择电极(ISE)是一种电化学传感器,其结构中有一个对特定离子具有选择性响应的敏感膜,将离子活度转换成电位信号,在一定范围内,其电位与溶液中特定离子活度的对数呈线性关系,通过与已知离子浓度的溶液比较可求得未知溶液的离子活度,按其测定过程又分为直接测定法和间接测定法,目前大部分采用间接测定法,由于间接测定法将待测样本稀释后测定,所测离子活度更接近离子浓度。

  ISE法具有标本用量少,快速准确,操作简便等优点。是目前所有方法中最为简便准确的方法。缺点:电极具有一定寿命,使用一段时问后,电极会老化。

  肝昏迷的生化机制

  (1)氨中毒学说:认为肝功能不全时,血氨的来源增多或去路减少,引起血氨升高。高浓度血氨干扰脑组织的能量代谢,抑制神经细胞膜的作用,影响神经递质的作用等,从而出现脑功能障碍而导致昏迷。

  (2)假神经递质学说:肝功能不全时,由于肝内单胺氧化酶活性降低或门体侧支循环的形成,致一些与去甲肾上腺素和多巴胺极为相似的假性神经递质在网状结构的神经突触部位堆积,使神经突触部位冲动的传递发生障碍,从而引起神经系统功能障碍而导致昏迷。

  (3)氨基酸不平衡与肝昏迷:在严重肝功能损伤和有门静脉短路条件下,血中支链氨基酸浓度明显降低,芳香族氨基酸明显增高,当大量芳香族氨基酸进入脑细胞,使假性神经递质生成增多,并抑制去甲肾上腺素合成,最终导致肝性昏迷。

  (4)γ-氨基酸学说:肝功能衰竭时,肝不能清除肠源性γ-氨基酸,使血中γ-氨基酸浓度增加,造成中枢神经系统功能抑制。

  淋巴细胞系统的组成

  1.原始淋巴细胞(lymphoblast):10~18μm,胞体圆形或椭圆形,核呈圆形或椭圆形,核染色质呈细颗粒状,核仁1~2个;胞浆量少,呈淡蓝色,透明,无颗粒。

  2.幼稚淋巴细胞(prolymphocyte):10~16μm,核圆形或椭圆形,核染色质仍较细致,核仁可有可无;胞浆量较少,淡蓝色,偶见有少许红色颗粒。

  3.淋巴细胞(lymphocyte)

  ①大淋巴细胞:12~15μm,核圆形稍偏于一侧,核染色质排列紧密均匀,深紫红色;胞浆量相对较多,染透明淡蓝色,可有少量大小不等的红色嗜天青颗粒。

  ②小淋巴细胞:6~9μm,核相对较小,呈圆形,核染色质紧密呈大块状,结构不清楚,染深紫红色;胞浆极少,似裸核样,如可见则呈淡蓝色,一般无颗粒。

  自身免疫病的概念

  健康个体的正常免疫调节功能会将自身耐受和自身免疫协调在一个相辅相成的合理水平上。当某种原因使自身免疫应答过分强烈时,也会导致相应的自身组织器官损伤或功能障碍,这种病理状态就称为自身免疫病。

  自身免疫病有以下特点:

  1.患者血液中可以检出高滴度的自身抗体和(或)与自身免疫组织成分起反应的致敏淋巴细胞。

  2.患者组织器官的病理特征为免疫炎症,并且损伤的范围与自身抗体或致敏淋巴细胞所针对的抗原分布相对应。

  3.用相同抗原在某些实验动物中,可复制出相似的疾病模型,并能通过自身抗体或相应致敏淋巴细胞使疾病在同系动物间转移。

  上述三个特点是自身免疫的三个基本特征,也是确定自身免疫病的三个基本条件。除此之外,目前所认识的自身免疫病往往还具有以下特点:

  4.多数病因不明,常呈自发性或特发性,有些与病毒感染或服用某类药物有关。

  5.病程一般较长,多呈反复发作和慢性行迁延的过程,病情的严重程度与自身免疫应答呈平行有关系。

  6.有遗传倾向,但多非单一基因作用的结果;HLA基因在某些自身免疫病中有肯定的作用。

  7.发病的性别和年龄倾向为女性多于男性,老年多于青少年。

  8.多数患者血清中可查到抗核抗体。

  9.易伴发于免疫缺陷病或恶性肿瘤。

  常规免疫检测技术

  (一)皮内试验

  宿主在病原体刺激后,体内产生亲细胞性抗体(IgE和IgG4)。当其与相应抗原结合后,肥大细胞和嗜碱性粒细胞脱颗粒,释放生物活性物质,引起注射抗原的局部皮肤出现皮丘及红晕,以此便可判断体内是否某有种特异性抗体存在。

  (二)免疫扩散和免疫电泳

  1.免疫扩散于 一定条件下,抗原与抗体在琼脂凝胶中相遇,在二者含量比例合适时形成肉眼可见的白色沉淀。本法有两种类型:

  ①单相免疫扩散:将一定量的抗体混入琼脂凝胶 ,使抗原溶液在凝胶中扩散而形成沉淀环,其大小与抗原量成正比;

  ②双相免疫扩散:将抗原与抗体分别置于凝胶板的相对位置,二者可自由扩散并在中间形成沉 淀线。用双相免疫扩散法既可用已知抗原检测未知抗体,也可用已知抗体检测未知抗原。

  2.免疫电泳是将免疫扩散与蛋白质凝胶电泳相结合的一项技术。事先将抗原在凝胶板中电泳,之后在凝胶槽中加入相应抗体,抗原和抗体双相扩散后,在比例合适的位置,产生肉眼可见的弧形沉淀线。

  (三)间接红细胞凝集试验

  以红细胞作为可溶性抗原的载体并使之致敏。致敏的红细胞与特异性抗体结合而产生凝集,抗原与抗体间的特异性反应即由此而显现。常用的红细胞为绵羊或O型人红细胞。

  (四)间接荧光抗体试验

  vvv本 法用荧光素(异硫氰基荧光素)标记第二抗体,可以进行多种特异性抗原抗体反应,即可检测抗原又可检测抗体。本法具有较高的敏感性、特异性和重现性等优点, 除可用于寄生虫病的快速诊断,流行病学调查和疫情监测外,还可用于组织切片中抗原定位以及在细胞和亚细胞水平观察和鉴定抗原、抗体和免疫复合物。

  (五)对流免疫电流试验

  对流免疫电泳试验是以琼脂或琼脂糖凝胶为基质的一种快速,敏感的电泳技术。既可用已知抗原检测抗体,又可用已知抗体检测抗原。反应结果可信度高,适用范围广。以本法为基础改进的技术有酶标记抗原对流免疫电泳和放射对流免疫电泳自显影等技术。二者克服了电泳技术本身不够灵敏的弱点。

  (六)酶联免疫吸附试验

  vvv酶联免疫吸附试验原理是将抗原或抗体与底物(酶)结合,使其保持免疫反应和酶的活性。把标记的抗原或抗体与包被于固相载体上的配体结合,再使之与相应的无色底物作用而显示颜色,根据显色深浅程度目测或用酶标仪测定OD值判定结果。

  免疫电泳技术原理

  免疫电泳技术实质上是在直流电场作用下的凝胶扩散试验。它的原理是将凝胶扩散置于直流电场中,在一定的条件下,抗原及抗体离解成为带正电或负电的电子,在电场中向异相电荷的电极移动,所带净电荷量越多、颗粒越小,泳动速度越快,反之则慢。由于电流加速了抗原、抗体的运行速度,缩短了两者结合的时间,加快了沉淀现象的产生。当有多种带电荷的物质电泳时,由于静电荷不同,而区分成不同区带,使抗原决定簇不同的成分得以区分。

  影响因素有:①电场强度;②溶液pH;③离子强度;④电渗等。

  总补体溶血活性影响因素

  【参考范围】比色法:60~120kU/L.

  【影响因素】

  1.在补体测定中标本采集与保存极为重要,即待检标本要新鲜。一般静脉取血后,置室温1h使血液凝固,分离血清后最好2h之内检测完毕,否则应尽快置-20℃保存,避免反复冻溶,以防补体活性降低。

  2.补体活性不甚稳定,56℃30min、剧烈振荡、酸碱、乙醇、乙醚、肥皂、蛋白酶等均可使其灭活,因此检测所用器皿要洁净并呈中性。

  3.该实验影响因素较多,操作要严格,溶血素、绵羊红细胞等配制要准确。

  【临床意义】补体是存在于正常人和脊椎动物新鲜血清中的一组不耐热、经活化后具有酶活性的复杂球蛋白,统称为补体系统,目前已发现该系统包含有30多种可溶性蛋白和膜结合蛋白,其中大部分由肝脏和脾脏中的巨噬细胞合成。补体是机体重要的防御因子,广泛参与抗微生物防御反应及免疫调节,能与任何一种抗原-抗体复合物结合并被激活,产生溶解靶细胞、促进吞噬、清除免疫复合物、参与炎症反应等一系列生物活性反应,同时也可介导变态反应及自身免疫性疾病的病理损伤。

  1.CH50升高常见于各种急性期反应,如急性炎症(风湿热急性期、结节性动脉炎、皮肌炎、伤寒、麻疹、黑热病、肺炎、急性心肌梗死、甲状腺炎、阻塞性黄疸)、组织损伤、恶性肿瘤特别是肝癌等可较正常高2~3倍。

  2.CH50降低补体消耗增加见于血清病、链球菌感染后肾小球肾炎、SLE、冷球蛋白血症、自身免疫性溶血性贫血、类风湿性关节炎、移植排斥反应等;补体大量丧失见于肾病综合征、大面积烧伤、外伤、手术和失血过多;补体合成不足见于肝硬化、慢活肝、急性肝炎重症患者等。

  3.判断补体检测结果时应注意动态观察,最好数种补体成分同时检测,以便对患者病情进行综合分析。

  误差和不确定度

  区分误差和不确定度很重要,因为误差定义为:被测量的单位结果和真值之差。

  由于真值往往不知道,故误差是一个理想的概念,不可能被确切地知道。

  但不确定度是可以一个区间的形式表示,如果是为一个分析过程和所规定样品类型做评估时,可适用于其所描述的所有测量值。

  因此,测量误差与测量不确定度无论从定义、评定方法、合成方法、表达形式、分量的分类等方面均有区别。

  免疫浊度法原理

  当可溶性抗原与相应抗体在两者比例合适时,抗原抗体在特殊缓冲液中快速形成抗原抗体复合物,使反应液出现浊度,如形成的复合物增加,反应液的浊度随之增加,与一系列的标准品对照,即可计算出受检物的含量。

  按照仪器设计的不同分为透射比浊仪测定法和散射比浊仪测定法。测定方法又可分为速率法和终点法。

  凝胶内沉淀试验

  凝胶内沉淀试验是利用可溶性抗原和相应抗体在凝胶内扩散,形成浓度梯度,在抗原与抗体浓度比例恰当的位置形成肉眼可见的沉淀线或沉淀环。

  凝胶支持物的种类:凝胶支持物的种类有琼脂、琼脂糖、葡聚糖或聚丙烯酰胺凝胶等。不同分子量的物质在凝胶中扩散速度不同,藉此可用以识别不同待测物分子量的差别。

  免疫电泳技术原理

  免疫电泳技术实质上是在直流电场作用下的凝胶扩散试验。它的原理是将凝胶扩散置于直流电场中,在一定的条件下,抗原及抗体离解成为带正电或负电的电子,在电场中向异相电荷的电极移动,所带净电荷量越多、颗粒越小,泳动速度越快,反之则慢。由于电流加速了抗原、抗体的运行速度,缩短了两者结合的时间,加快了沉淀现象的产生。当有多种带电荷的物质电泳时,由于静电荷不同,而区分成不同区带,使抗原决定簇不同的成分得以区分。

  影响因素有:①电场强度;②溶液pH;③离子强度;④电渗等。

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